蘇木素-伊紅染色液

使用說明書

僅供體外研究使用，不用于臨床診斷!

第1版（2016年04月修訂）

[關(guān)聯(lián)信息]

HE染色法采用兩種染料即堿性染料蘇木素和酸性染料伊紅分別于細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)發(fā)生作用，使細(xì)胞的微細(xì)結(jié)構(gòu)通過顏色而改變它的折光率，從而在光鏡下能清晰地呈現(xiàn)出細(xì)胞圖像。組織細(xì)胞內(nèi)含有酸性物質(zhì)和堿性物質(zhì)，其中酸性細(xì)胞核會被堿性的蘇木素染成藍(lán)色，而堿性的胞漿被會被酸性染料伊紅染成紅色，從而使得胞核呈藍(lán)色，胞漿呈紅色。

[制品內(nèi)容]

編號	名稱	規(guī)格
IS098-1	蘇木素染液工作液	100ml
IS098-2	伊紅染液工作液	100ml

[儲存及有效期]

低溫陰涼處保存，有效期一年。

[使用方法]

以下步驟僅供參考

（一）石蠟切片染色

1. 取材組織塊，經(jīng)固定后，常規(guī)石蠟包埋，切片。

2. 石蠟切片脫蠟水化：

①二甲苯（I）中脫蠟10min。

②換用新鮮的二甲苯（Ⅱ），再脫蠟10min。

③無水乙醇 5 min。

④95%乙醇 2min。

⑤80％乙醇 2min

⑥70%乙醇 2min。

⑦蒸餾水   2min。

3. 蘇木素染液染色5-10min(具體時(shí)間根據(jù)染色結(jié)果和實(shí)驗(yàn)要求調(diào)整)，蒸餾水沖洗。

4. 分化液分化3s, 自來水沖洗干凈。

5. 自來流水沖洗5-10min      。

6. 置伊紅染液1min-2min(具體時(shí)間根據(jù)染色結(jié)果和實(shí)驗(yàn)要求調(diào)整)。

7. 蒸餾水浸泡 15s。

8. 脫水，透明，封片：

①95％乙醇（I）30s

②95％乙醇（Ⅱ）30s

③100％乙醇（I）1min

④100％乙醇（Ⅱ）1min

⑥二甲苯（I）10min

⑦二甲苯（Ⅱ）10min

⑧中性樹膠封固，鏡下觀察。

（二）冰凍切片染色（快速染色法）

1. 將冰凍切片置于固定液中固定30s－1min。

2. 蒸餾水沖洗。

3. 置于蘇木素染液工作液染色3－5min。

4. 分化液分化3s。

5. 蒸餾水浸泡 15min 或溫水（約 50℃）5min。

6. 置伊紅染液10-20s (具體時(shí)間根據(jù)染色結(jié)果和實(shí)驗(yàn)要求調(diào)整)，蒸餾水沖洗。

7. 脫水，透明，封片。（步驟同石蠟切片）

[注意事項(xiàng)]

1、石蠟切片脫蠟應(yīng)盡量干凈，操作過程中使用的乙醇需經(jīng)常更換新液。

2、安排好預(yù)實(shí)驗(yàn)，確定好染色的時(shí)間，通常只需能夠分辨細(xì)胞核即可，顏色過深有可能影響細(xì)胞質(zhì)顏色。

3、冰凍切片染色時(shí)間盡量縮短，避免染色過量使得結(jié)果不好分析。

4、低溫情況下分化液可能會產(chǎn)生些許沉淀。如果發(fā)現(xiàn)有沉淀產(chǎn)生，請置于37℃水浴至完全溶解后使用。

5、為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作并嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)室安全操作手冊進(jìn)行。

6、伊紅在純水和梯度酒精脫水的時(shí)候容易褪色，后期脫水不宜在梯度酒精浸泡太久。