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急性脊髓損傷(ASCI)大鼠模型

Rat Model for Actue Spinal Cord Injury (ASCI)

Traumatic Spinal Cord Injury

  • 編號UDSI545Ra01
  • 物種Rattus norvegicus (Rat,大鼠) 相同的名稱,不同的物種。
  • 原型物種
  • 來源Allen’s法導致脊髓損傷
  • 模式動物品系SPF級Wistar大鼠,健康,雄性,體重為180g~200g
  • 實驗分組實驗分六組:正常對照組、模型組、陽性藥組、受試藥組三個劑量組,每組15只動物。
  • 實驗周期4w
  • 建模方法1.取正常大鼠用水合氯醛作腹腔麻醉(350mg/kg),將大鼠俯臥,固定于大鼠固定板上,在背部脊髓兩側觸摸大鼠最下肋與軟組織分界處(浮肋與第 13胸椎連接處)作為骨定位標志,向上、下5 cm 范圍備皮、脫毛后常規消毒,鋪無菌手術單,在后正中線做縱行切口,大約 3cm,依次切開皮膚、皮下筋膜,暴露椎旁肌,約平對第 10 胸椎棘突,鈍性剝離肌肉暴露棘突、椎板和橫突。參考定位:T9棘突傾向尾側,T10 棘突中立位,T11 棘突傾向頭側。
    2.確定 T10胸椎位置,用骨剪在 T9 與 T10、T10與T11 棘突及相應椎板之間分別做兩個橫行剪口,再在 T10 胸椎兩側,橫突與椎板連接處做縱行剪口,形成一個方形剪口界線,然后用咬骨鉗咬住 T10 胸椎棘突用力拉起即“揭蓋”,去除 T10 椎板,形成方形骨窗,修整骨窗邊緣,充分暴露 T10對應的脊髓。
    3. 用Allen' s 撞擊器制備脊髓損傷動物模型,打擊時,用拉鉤拉開脊髓兩側軟組織,牽拉固定,使脊柱穩定,不受呼吸運動影響,使 20 g 重量的擊打棍從 3 cm 高度自由落體,致傷能量 60 g·cm,撞擊T10 骨窗對應的脊髓,造成急性脊髓損傷,擊打脊髓后,擊打棍不動,停留 3 min 再移開。
    4. 撞擊成功標準為:撞擊脊髓組織水腫、出血,硬脊膜完整呈紫紅色,緊張,膨隆,大鼠尾巴出現痙攣性擺動,雙下肢軀體回縮樣撲動,呈遲緩性癱瘓。常規分層縫合后回籠飼養。
    5. 術后4W,水合氯醛腹腔注射麻醉大鼠后,將大鼠固定于固定板上,暴露脊髓 T8~ T12,迅速取出脊髓組織,4%多聚甲醛后固定 4 h,石蠟包埋切片(厚4um),HE染色,觀察病理改變。
  • 應用疾病模型
  • 下載 英文說明書   中文說明書
  • 規格 每例
  • 價格 ¥ 720
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  • 急性脊髓損傷(ASCI)大鼠模型 產品包裝(模擬)
  • 急性脊髓損傷(ASCI)大鼠模型 產品包裝(模擬)
  • 急性脊髓損傷(ASCI)大鼠模型 Fig 1. Allen 's impactor hits the spinal cord
  • 急性脊髓損傷(ASCI)大鼠模型 Fig. Neurological Tracing of BDA in Rat Spinal Cord
  • Certificate 通過ISO 9001、ISO 13485質量體系認證

模型評價

1. 術后一般情況觀察 :各損傷組大鼠的術后基本情況基本一致,打擊后大鼠均表現為身體痙攣性顫動,尾巴痙攣性擺動,雙下肢及軀體回縮樣撲動。麻醉蘇醒后大鼠雙下肢呈弛緩性癱瘓,可出現尿潴留或尿失禁。解剖可見傷后大鼠硬脊膜內充血或水腫。
2.做BBB評分:0分:無可見后肢運動,1分:一或兩個關節輕微運動,通常為髖和/或膝關節,都可認為造模成功;
3.斜板實驗:將大鼠身體垂直于斜板的縱軸放置,斜板由自制的表面粗糙的木板制成,大鼠利用前肢和后肢的力量保持身體停留自斜板上。斜板每次升高或降低5度,以保證大鼠能停留在斜板上5秒,以能停留5秒的最大角度為其功能值。
4.BDA示蹤術:術后5W,將大鼠麻醉后固定在腦立體定位儀上,縱行切開顱頂區頭皮,剪開骨膜并推向四周,雙氧水棉簽擦拭顱骨,參考大鼠腦離體定位圖譜,以前囟為原點,共選擇 8 個位置鉆孔,微量進樣器將5% BDA 溶液1μL注射入大鼠腦運動皮質區,進針深度自顱骨表面起始約3.5mm,微量注射泵設置注射時間為5min,(留針5min)注射完畢后縫合頭皮。2w后取損傷節段以下脊髓組織標本進行BDA 熒光染色,觀察皮質脊髓束神經纖維。
5.大鼠坐骨神經熒光金逆行追蹤:各組隨機取大鼠,麻醉后沿股外側肌間隙顯露坐骨神經,通過組織鉗鉗夾挫傷坐骨神經,在避光條件下使用微量注射器在坐骨神經挫傷區多點注射2%熒光金,每側坐骨神經注射0.4ul,注射速度為0.1ul/min。每注射位點留針5min,切口內撒8*104U的青霉素粉劑,逐層縫合切口,造模后正常飼養。1周后予脊髓損傷處取材進行組織學檢查。進行冰凍切片,20um切片,每組每只動物5張切片,熒光顯微鏡下觀察熒光金標記細胞的分布情況。

組織病理學

HE 染色可以觀察到假手術組灰、白質組織結構基本完整,神經細胞在灰質中分布均勻、胞體飽滿、形態正常、細胞膜完整,白質內神經纖維排列整齊, 細胞間質均勻。SCI 組可見灰、白質組織結構不完整,損傷區灰質可見大片出血、大片壞死灶 、細胞腫脹、有的出現囊腔,白質內神經纖維排列不規則。

標志因子水平

統計學分析

應用SPSS軟件進行統計分析,計量資料以均數±標準差(x ±s)表示,采用t檢驗,組間比較采用單因素方差分析,P<0.05表示有顯

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